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    PCR實(shí)驗室設計及建設要求

    發(fā)布時(shí)間: 2021-11-27  點(diǎn)擊次數: 3057次

     

    PCR實(shí)驗指的是基因擴增實(shí)驗,其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加,是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗的常規方法,PCR實(shí)驗室廣泛應用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域,博泰小編帶大家了解PCR實(shí)驗室設計及建設要求有哪些。


    、PCR實(shí)驗室布局

    PCR實(shí)驗室原則上為試劑準備區,樣品制備區,擴增區和擴增產(chǎn)物分析區四個(gè)單獨的工作區域,并設有專(zhuān)用走廊,各工作區域應設緩沖間,工作區與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區應是分隔獨立的,各工作區有明顯的標志,不能直通,如果緊密連接,需安裝物品傳遞窗。前兩區為擴增前區,后兩區為擴增后區。


    、實(shí)驗室各區功能及主要設備

    1、試劑準備區:主要進(jìn)行試劑的制備,分裝和主反應混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應直接運送至該區域。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的試劑。本區主要設備有天平,冰箱,離心機,加樣器,振蕩器等。


    2、樣品制備區:主要進(jìn)行樣品的保存,核酸提取,貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區主要設備有冰箱,生物安全柜,離心機,加樣器,振蕩器等。本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進(jìn)入本區的氣溶膠污染,一般為+10Pa。


    3、擴增區:主要進(jìn)行DNA擴增。此外,已制備的DNA模板的加入和主反應混合液制備成反應混合液等也可在本區內進(jìn)行。本區主要設備有:擴增儀,冰箱,離心機,加樣器等。本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶從本區漏出一般為-25Pa。


    4、擴增產(chǎn)物分析區:擴增產(chǎn)物的測定。本區主要設備有酶標儀,洗板機.加樣器和水浴箱等。本區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,一般為-25Pa,以避免擴增產(chǎn)物從本區擴散至其它區域。


    三、PCR實(shí)驗室通風(fēng)系統及壓力控制

    各區域之間應具備單間的實(shí)驗工藝流,物流,人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實(shí)驗室之間的相互干擾,防止氣溶膠擴散對實(shí)驗過(guò)程造成污染。PCR實(shí)驗室并沒(méi)有嚴格的凈化要求,但是為避免各個(gè)實(shí)驗區域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴格控制送,排風(fēng)的比例以保證個(gè)實(shí)驗區的壓力要求。


    、PCR實(shí)驗室裝飾

    實(shí)驗室圍護結構應牢固,氣密性好;所有陰陽(yáng)角宜采用圓弧過(guò)度;墻體內壁光潔,不積塵,耐腐蝕,易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環(huán)氧樹(shù)脂自流坪,材料應滿(mǎn)足無(wú)縫隙,無(wú)滲漏,光潔,耐腐蝕的要求。


    、PCR實(shí)驗室注意事項

    1、試劑準備區,樣品制備區設緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。

    2、幾個(gè)區域的大小設置情況,試劑準備區,擴增區,擴增產(chǎn)物分析區,空間可以相對小一些,樣品制備區要放置生物安全柜和低溫冰箱,空間應大一些。


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